Desarrollo de una metodología para la evaluación de proteínas secretadas por macrophomina phaseolina al medio de cultivo
Macrophomina phaseolina, es un hongo necrotrófico capaz de infectar cultivos de importancia económica, tales como la soja y el sésamo. Éste hongo secreta una amplia variedad de proteínas que le permiten invadir a la planta e iniciar el proceso de infección. Por lo tanto, numerosos estudios se basan...
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2018-10-18 |
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Benegas López, Andrea C. Flores-Giubi, M. Eugenia Romero-Rodríguez, M. Cristina |
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Ciencias agrarias Ciencias e Investigación |
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Macrophomina phaseolina, es un hongo necrotrófico capaz de infectar cultivos de importancia económica, tales como la soja y el sésamo. Éste hongo secreta una amplia variedad de proteínas que le permiten invadir a la planta e iniciar el proceso de infección. Por lo tanto, numerosos estudios se basan en las proteínas con actividad hidrolílica secretadas por este hongo, sin embargo, las proteínas sin actividad enzimática también podrían estar implicadas en este proceso. En el presente trabajo se planteó el desarrollo de una metodología para la evaluación de proteínas secretadas por M. phaseolina al medio de cultivo Papa Dextrosa Caldo (PDB). Se optimizó una metodología de purificación de proteínas para la posterior evaluación del perfil proteico mediante una electroforesis unidimensional SDS-PAGE mediante la evaluación de tres metodologías de purificación de proteínas. El método más efectivo de purificación fue la precipitación de proteínas con ácido tricloroacético(TCA) el cual permitió obtener un rendimiento de 3,9 mg de proteína por gramos de liofilizado y un perfil proteico nítido para su análisis |
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Macrophomina phaseolina, es un hongo necrotrófico capaz de infectar cultivos de importancia económica, tales como la soja y el sésamo. Éste hongo secreta una amplia variedad de proteínas que le permiten invadir a la planta e iniciar el proceso de infección. Por lo tanto, numerosos estudios se basan en las proteínas con actividad hidrolílica secretadas por este hongo, sin embargo, las proteínas sin actividad enzimática también podrían estar implicadas en este proceso. En el presente trabajo se planteó el desarrollo de una metodología para la evaluación de proteínas secretadas por M. phaseolina al medio de cultivo Papa Dextrosa Caldo (PDB). Se optimizó una metodología de purificación de proteínas para la posterior evaluación del perfil proteico mediante una electroforesis unidimensional SDS-PAGE mediante la evaluación de tres metodologías de purificación de proteínas. El método más efectivo de purificación fue la precipitación de proteínas con ácido tricloroacético(TCA) el cual permitió obtener un rendimiento de 3,9 mg de proteína por gramos de liofilizado y un perfil proteico nítido para su análisis |
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